Freie SH-Gruppen[1]                                       1.4.1998

Phosphatpuffer (0.1 M, pH 8)

1.42 g   Na₂HPO₄ anhydrat

ad 100 ml Aqua a.i., pH 8 mit Phosphorsäure

DTNB-Lösung

39.6 mg  DTNB                        Sigma D 8130 oder Merck 1.03291

10 ml    Phosphatpuffer pH 8

Meßansatz

1.5 ml   ¹/₁₀ Phosphatpuffer pH 8

20 µl    DTNB-Lösung

20 µl    Probe oder Standard (z.B. 1mM GSH bzw. 0,5mM DTT)

messen bei 420 nm (oder 412 nm) gegen Leerwert

Meßansatz für Mikrotiterplattenleser

1.5 ml   ¹/₁₀ Phosphatpuffer pH 8

40 µl    DTNB-Lösung

 

180 µl   ¹/₁₀ Phosphatpuffer / DTNB-Lösung

20 µl    Probe oder Standard

Anmerkung

• DTT ist die Abkürzung für 1,4-Dithio-DL-threitol
• DTNB: 2,2’-dinitro-5,5’-dithiodibenzoesäure; 5,5'-Dithiobis(2-nitrobenzoic acid)
• nur die Konzentrationen 2mM bis 0,3125 mM DTT erbrachten einen linearen Eichkurvenverlauf (bei höheren Konzentrationen war die Funktion eine Parabel, bei niedrigeren Konzentrationen konnte das Messgerät keine Werte ermitteln)